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哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立

时间:2015-08-31来源:本站作者:玉研仪器

  采用鸡卵清蛋白(ova)致敏和激发,建立balb/c 小鼠哮喘模型。具体分生理盐水对照组和哮喘模型组,每组18 只,分成10 只及8 只两部分,分别用无创和有创的方法测定气道反应性(分别用penh-asthma组、penh-ns 组、ri-asthma 组、ri-ns 组表示)经相应致敏激发后,用小鼠肺功能仪检测其气道反应性。雾化吸入0.2~50 mg/ml 倍增浓度的乙酰甲胆碱激发,测定相应浓度下的增强的呼气间歇(penh)值或气道阻力(ri)值等指标。所有动物都行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分类计数。最后测得 penh-asthma、ri-asthma 组的嗜酸粒细胞(%)为55.00±1.41,显著高于对照组的0.44±0.62(p<0.01)。penh-asthma 组pc100 均 ≤6.25 mg/ml,对照组pc100 均≥12.5 mg/ml。同时,其log2(10pc100)值(5.36±0.84)显著低于对照组(7.97±0.82),两组比较差异有统计学意义(p<0.01)。penh-asthma组从mch 为3.12 mg/ml 开始,其penh 值明显高于对照组。ri-asthma 组的ri 值从0.39 mg/ml 开始就明显高于相应对照(p<0.05)。penh-asthma 组与 ri-asthma 组的气道反应性相关(r=0.962,p<0.01)。

  因此从气道炎性指标上看,penh-asthma 组和ri-asthma 组的嗜酸粒细胞明显高于各自的对照组(p<0.01)。而本实验所制作的模型是参照我所于2006 年已成功制作的支气管哮喘模型,说明该模型的气道炎性有良好的重复性。而在气道高反应性的检测上,从pc100 的分布上看,penh-asthma 组出现penh倍增的mch 浓度级都集中在低水平(pc100 均≤3.12 mg/ml),而对照组的明显集中在高浓度水平(pc100均≥25 mg/ml);penh-asthma 组log2(10pc100)值显著低于对照组(p<0.01),强烈支持penh- asthma组存在气道高反应性,也体现了penh 良好的检测效能。而将反映penh-asthma 组和ri-asthma 组的气道反应性的 penh 值和ri 行相关分析,结果非常接近1(p<0.01),这就证实了2 种方法密切相关。此外,在检测小鼠气道反应性过程中,行无创法的小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测6 只小鼠,动态观察也不受限;这些在有创法中都无法实现。综上所述,以penh 为主要测定指标的无创肺功能检测方法作为 balb/c 雌鼠气道高反应性的检测可行、高效。

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